▲逆转录原理
（2）恒温扩增：恒温扩增往往联合分子信标技术，由于分子信标有较高的特异性和灵敏度，因此可同时分析基因多位点突变。与逆转录扩增不同，恒温扩增首先通过逆转录酶产生靶标RNA的双链DNA拷贝，然后再利用特定聚合酶从该DNA拷贝上产生RNA（靶标为RNA，产物仍为RNA）。
▲恒温扩增RNA原理
基因测序
病原宏基因组测序（mNGS）是一种基于二代测序技术（NGS）的病原基因序列检测方法，主要用于基因序列分析、进化树分析及病毒变异研究。mNGS与RT-PCR有较强的互补性， RT-PCR检测速度快、操作流程简单、成本较低，适于大规模筛查；对于RT-PCR检测阳性的样本， 进一步利用mNGS做病毒测序，用于溯源进化分析、预测病毒传播模式、发现和分析突变位点等。
▲宏基因组用于病原学研究
抗原检测
新冠病毒抗原检测多采用免疫学方法，包括胶体金法、乳胶法等，当样本中新冠病毒浓度较高时，与胶体金标记或包被乳胶颗粒的抗体形成复合物，产生颜色反应或浊度变化，通常在15~20分钟内获得检测结果。此种方法为定性检测，不能进行病毒定量分析，主要用于急性感染期病毒载量较高时的快速检出，也可用于对疑似人群的快速分流和管理。 由于检测结果可能受到样本类型以及潜在变异株影响而致假阴性，因此不能单独用于新冠病毒感染的诊断，需结合患者的临床表现、核酸检测以及治疗情况做综合分析。
抗体检测
新冠病毒抗体检测同样多采用免疫学方法，除了上文提到的胶体金法外，还包括了荧光免疫层析法、酶联免疫法、化学发光法等，定性检测人血液样本中新型冠状病毒IgM/IgG抗体。IgM抗体产生于感染急性期，维持时间短，阳性提示早期感染。IgG抗体产生晚，维持时间长，阳性提示感染和既往感染。 新冠病毒抗体检测不能作为新冠病毒感染的确诊和排除依据，不适用于一般人群的筛查，仅可作为核酸检测的补充指标，结合临床表现和治疗情况联合评估。
医咖介绍
任静
总医院精准医学中心副主任，生物医学工程博士，主任技师，司法鉴定人，遗传咨询师，白求恩精神研究会血栓与止血专委会副主任委员，中华预防医学会过敏病预防与控制专委会诊断学组委员，天津抗癌协会肿瘤转化医学专业委员会委员，天津医师协会检验分会委员。
曾获天津市科技进步一等奖1项、天津滨海新区科技进步三等奖1项，发表学术论著50余篇，主编/参编《凝血紊乱》《中国血栓性疾病防治指南》等学术著作5部。
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来源：天津医科大学
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